آنالیز مولکولی ژن ligb در سرووارهای واکسینال لپتوسپیرا اینتروگانس در ایران

Authors

فریبا فتوحی1، پژواک خاکی1،2 ، رضا پیله چیان لنگرودی3 ،

بهزاد صالحی1 ، مهرانگیز دژبرد2

abstract

مقدمه و هدف: لپتوسپیروز که در اثر عفونت با گونه های بیماری زای لپتو سپیرا ایجاد می شود , یکی از شایع ترین بیماری های مشترک انسان و دام در جهان است. واکسن های لپتوسپیرایی در حال حاضر از جسم کامل کشته شده سرووارهای غالب محلی تهیه می شوند. این واکسن ها علاوه بر ناکارآمدی در ایجاد ایمنی متقاطع بین سرووارهای مختلف لپتوسپیرا , منجر به القای ایمنی کوتاه مدت و همچنین عوارض جانبی جدی نیز می گردند. بنابر این طراحی و ساخت یک واکسن نوترکیب کارآمد برای کنترل لپتوسپیروز بسیار حائز اهمیت می باشد.پروتئین ligb تنها در گونه های بیماری زای لپتوسپیرا بیان می شود. آنتی ژن حفاظت شده ligb در واکسیناسیون و روش های تشخیص سرولوژیکی لپتوسپیروز اهمیت ویژه ای دارد.به منظور دست یابی به ترتیب نوکلئوتیدی و بررسی پلی مورفیسم ژن ligb در سرووارهای استاندارد غالب لپتوسپیرا در ایران , ژن مذکور کلون و تعیین توالی گردید. مواد و روش کار: سه سروواربیماری زای گونه اینتروگانس و یک گونه غیر بیماری زای لپتوسپیرا (l.biflexa) جهت تلقیح در محیط کشت انتخابی و استخراج dna ژنومی به روش استاندارد فنل کلروفرم، مورد استفاده قرار گرفتند.پرایمرهای اختصاصی به منظور تکثیر ژن ligb طراحی شد. محصولات pcr به دست آمده از سرووارهای بیماری زا به وکتور pjet1.2 / متصل شده و به سلولهای مستعد شده e.coli سویه top10  منتقل شدند.نهایتا نوترکیب پلاسمید استخراج و تعیین توالی گردید. نتایج و بحث: محصول pcr ژنligb از سرووارهای بیماری زای لپتوسپیرای مورد آزمایش یک قطعه 1041 جفت بازی بود که این قطعه در گونه غیر بیماری زا مشاهده نگردید. نتایج ما نشان داد که قرابت نوکلئوتیدی ژن ligb بین (rtcc2808) l.grippotyphosa و(rtcc2821)hardjo l.sejroe 8/90 در صد بود در حالی که سرووار(rtcc2805) l.canicola با دو سرووار دیگر بر اساس این ژن شباهت کمتری (3/72درصد) داشت.بر اساس نتایج حاصل از این مطالعه و مطالعات سایرین مشخص شده است که، توالی نوکلئوتیدی ژن ligb در لپتوسپیراهای مختلف اندکی متفاوت است. ligb به عنوان یک آنتی ژن پروتئین اختصاصی جنس لپتوسپیرا معرفی شده است ، از این رو ژن کلون شده در تحقیق حاضر را می توان با هدف بیان پروتئین نوترکیب و استفاده از آن در تهیه واکسن موثر علیه لپتوسپیروز مورد استفاده قرار داد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

آنالیز مولکولی ژن ligB در سرووارهای واکسینال لپتوسپیرا اینتروگانس در ایران

 مقدمه و هدف: لپتوسپیروز که در اثر عفونت با گونه های بیماری زای لپتو سپیرا ایجاد می شود , یکی از شایع ترین بیماری های مشترک انسان و دام در جهان است. واکسن های لپتوسپیرایی در حال حاضر از جسم کامل کشته شده سرووارهای غالب محلی تهیه می شوند. این واکسن ها علاوه بر ناکارآمدی در ایجاد ایمنی متقاطع بین سرووارهای مختلف لپتوسپیرا , منجر به القای ایمنی کوتاه مدت و همچنین عوارض جانبی جدی نیز می گردند...

full text

کلونینگ وتعیین توالی ژن کد کننده lipL21، در سرووارهای واکسینال لپتوسپیرا اینتروگانس

زمینه: لپتوسپیروزیس نوعی بیماری مشترک بین انسان و دام است، که توسط باکتری لپتوسپیزا اینتروگانس ایجاد می‌شود. ژن بیان کننده LipL21 یکی از ژن‌های شناسایی شده در باکتری لپتوسپیرا است که فقط در سویه‌های بیماری‌زا وجود دارد. هدف از این تحقیق کلونینگ و آنالیز تعیین توالی ژن کد کننده لیپوپروتئین سطحی LipL21 در 5 سرووار واکسینال باکتری لپتوسپیرا اینتروگانس در ایران می‌باشد. مواد و روش‌ها: سرووارهای بی...

full text

کلونینگ وتعیین توالی ژن کد کننده lipl۲۱، در سرووارهای واکسینال لپتوسپیرا اینتروگانس

زمینه: لپتوسپیروزیس نوعی بیماری مشترک بین انسان و دام است، که توسط باکتری لپتوسپیزا اینتروگانس ایجاد می شود. ژن بیان کننده lipl21 یکی از ژن های شناسایی شده در باکتری لپتوسپیرا است که فقط در سویه های بیماری زا وجود دارد. هدف از این تحقیق کلونینگ و آنالیز تعیین توالی ژن کد کننده لیپوپروتئین سطحی lipl21 در 5 سرووار واکسینال باکتری لپتوسپیرا اینتروگانس در ایران می باشد. مواد و روش ها: سرووارهای بیم...

full text

کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده لیپوپروتئین سطحی LipL41 در باکتری لپتوسپیرا اینتروگانس سرووار گریپوتیفوزا

زمینه و هدف: لپتوسپیروزیس یک بیماری عفونی می‌باشد که توسط سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا ایجاد می‌شود. افزایش ارتقای کیفی روش‌های کاربردی و معتبر در تشخیص این بیماری و همچنین تولید واکسن نوترکیب ، نیاز به آنتی‌ژن‌های اختصاصی دارد که در بین سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا یکسان و مشابه است. پروتئین‌های غشای خارجی لپتوسپیرا (OMPs)، آنتی‌ژن‌های مؤثری می‌باشند که قادر به تحریک پاسخ ایمنی مشخص در دوره ...

full text

کاربرد روش میکروآگلوتیناسیون در تعیین سرووارهای لپتوسپیرا

زمینه و هدف : لپتوسپیروزیس بیماری عفونی و زئونوزی است که توسط باکتری لپتوسپیرا ایجاد شده و به صورت مستقیم یا غیرمستقیم از حیوان به انسان انتقال می‌یابد. از آنجا که تشخیص سریع این بیماری می‌تواند در کنترل بیماری کمک شایانی نماید؛ این مطالعه به منظور تعیین سرووارهای شایع لپتوسپیرا با روش میکروآگلوتیناسیون (Microscopic Agglutination Test) در نمونه‌های سرمی انسان و دام انجام شد. روش بررسی : این مط...

full text

کلونینگ و تعیین توالی ژن کد کننده لیپوپروتئین سطحی lipl۴۱ در باکتری لپتوسپیرا اینتروگانس سرووار گریپوتیفوزا

زمینه و هدف: لپتوسپیروزیس یک بیماری عفونی می باشد که توسط سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا ایجاد می شود. افزایش ارتقای کیفی روش های کاربردی و معتبر در تشخیص این بیماری و همچنین تولید واکسن نوترکیب ، نیاز به آنتی ژن های اختصاصی دارد که در بین سرووارهای بیماریزای لپتوسپیرا یکسان و مشابه است. پروتئین های غشای خارجی لپتوسپیرا (omps)، آنتی ژن های مؤثری می باشند که قادر به تحریک پاسخ ایمنی مشخص در دوره ...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه دامپزشکی و آزمایشگاه

جلد ۴، شماره ۱، صفحات ۴۷-۴۷

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023